Proteozom İnhibisyonunun Domates Üzerindeki Etkilerinin Araştırılması


Creative Commons License

ÇAKIR Ö. (Yürütücü), KARPUZ B.

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, BAP Y.Lisans, 2019 - 2020

  • Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
  • Destek Programı: BAP Y.Lisans
  • Başlama Tarihi: Mart 2019
  • Bitiş Tarihi: Mart 2020

Proje Özeti

Proteinler, hücreler içindeki ana elemanlar olduğundan, seviyelerinin sıkı bir şekilde düzenlenmesi gerekir. Proteinler hatalı katlandıklarında, okside olup bozulduklarında ya da onlara daha fazla ihtiyaç kalmadığında parçalanıp uzaklaştırılmalıdır. Bu uzaklaştırma işlemi sayesinde hücreler kendilerini onarır, çoğalır ve yaşamlarına devam ederler. Proteozomlar, birçok sitosolik ve nükleer proteinin parçalanmasından sorumlu olan geniş altbirimlere sahip katalitik proteazlardır ve UbikuitinProteozom Sistemi (UPS) hücre içindeki hasarlı, yanlış katlanmış ve kısa ömürlü proteinlerin yıkımında önemli roller oynar. Proteozom sistemi bitkide kuraklık, tuzluluk, soğuk stresi, radyasyon ve besin eksikliği gibi çevresel streslere adaptasyon ve cevap oluşmasını sağlayan önemli bir sistem olarak tanımlanmıştır ve çevresel stresleri etkili bir şekilde algılamak ve cevap oluşturmak için bitkilerde proteomik değişim yapmaktadır. Proteozom inhibisyonu oksidatif stres kaynaklı olabilir ve proteozom yıkılması maya ve memeli hücrelerinde iyi tanımlanmıştır. Buna karşın, bitkilerde proteozom inhibisyonunun ne gibi sonuçlar doğurduğu bilgisi sınırlıdır. Proteozom arızalanması ve inhibisyonu hakkında hücresel aktivitelerin yeniden programlanması sebebiyle daha az bilgi bulunmaktadır. Bu tez projesi kapsamında, Lycopersicon esculentum (domates) tohumlarına yüzey sterilizasyonu yapıldıktan sonra in vitro olarak doku kültüründe MS (Murashige Skoog) besiyerinde çimlendirilecektir. Daha sonra in vitro’da yetiştirilmiş bitkilere belirli konsantrasyonlarda MG132 proteozom inhibitörü uygulanacaktır. Kontrol ve deney gruplarından elde edilen bitki kısımlarından proteozom aktivite tayini yapılarak proteozom inhibisyonu doğrulanacaktır. Ardından RNA izolasyonu ve cDNA sentezi yapılarak qRT-PZR (kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu) ile proteozom inhibisyonunun belirlenen antioksidan genlerin anlatımına etkisi belirlenecektir. Bu çalışma ile elde edilen sonuçlar sayesinde bitkilerde proteozom sistemi ve proteozom inhibisyonunun sonuçları hakkında veriler elde edilecektir. Ayrıca bitkilerde antioksidan sistemin proteozom inhibisyonu kaynaklı aktivitesi hakkında da yeni verilere ulaşılması hedeflenmektedir. Aynı zamanda önemli ölçüde antioksidan içeriğe sahip domates bitkisinde antioksidan mekanizmaların aydınlatılması çalışmalarına yeni veriler sunulacaktır.