Alhamwı R., Öksüz L. (Yürütücü)
Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2020 - 2021
Son
yıllarda giderek artan antibiyotik direnci nedeniyle çoğul dirençli Gram
negatif çomaklarda son tedavi seçeneği olarak kolistin kullanılmaya
başlanmıştır. Ancak kolistinin
antibiyotik duyarlılık deneylerinde rutin laboratuvarlarda sıkıntılar
yaşanmakta, büyük moleküllü kolistinin agara difüze olamaması nedeniyle minimal
inhibisyon konsantrasyon (MİK) değerlerinin belirlenmesi gerekmektedir.
Kolistin duyarlılığını saptanması için sıvı mikrodilüsyon (BMD) yöntemi EUCAST
(European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) ve CLSI (Clinical
and Laboratory Standards Institute) tarafından altın standart olarak tavsiye
edilmiş yöntemdir. Ancak emek yoğun ve zaman alıcı olması nedeniyle rutin
laboratuvarlarda uygulanamamaktadır. Son yıllarda önce genişlemiş spektrumlu
beta laktamaz (GSBL) üreten bakteriler ve ardından karpabaneme dirençli
Enterobacteriales ailesi üyesi bakteriler kolistine de direnç kazanmaya
başlamış ve tedavide ciddi sorunlar ortaya çıkmaya başlamıştır. Bu nedenle
kolistine dirençli bakterilerin etken olduğu infeksiyonların tedavisinde,
kolistin kombinasyonlarının kullanılması tercih edilmektedir. Bu çalışmada
otomatize olmayan dört yöntemle kolistin MİK değerlerinin değerlendirilmesi,
birbiriyle karşılaştırılması ve kolistine dirençli bakterilerin saptanması
durumunda kolistin-tigesiklin ve kolistin-meropenem kombinasynlarının sinerjik
etkilerinin araştırılması planlanmıştır.
İstanbul
Tıp Fakültesi Tıbbı Mikrobiyoloji laboratuvarına 2019 yılında çeşitli
kliniklerden gelen kan kültürü örneklerinden izole edilen toplam 100
çoğul-dirençli Gram negatif çomak (Escherichia coli, Klebsiella pneumonia,
Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, vb) çalışmaya dahil
edilecektir. Bu bakterilerin Kirby Bauer disk diffüzyon yöntemi ile antibiyotik
duyarlılık testi yapıldıktan sonra, makrodilüsyon, sıvı mikrodilüsyon, ticarı
mikrodilüsyon (sensititre®) ve yeni geliştirilen sıvı disk elüsyon
yöntemleriyle kolistin MİK değerleri saptanacaktır. Sıvı mikrodilüsyon referens
yöntem olarak kullanılarak diğer yöntemlerle elde edilen MİK değerlerinin
karşılaştırılması amaçlanmıştır. Ayrıca kolistine dirençli suşlarda
kolistin-tigesiklin ve kolistin-meropenem kombinasyonları sıvı mikrodilüsyon
“checker board” yöntemi ile araştırılacaktır.
Buyyonda
disk elüsyon, ticari sıvı mikrodilüsyon ve makrodilüsyon ile elde edilecek
kolistin MİK değerlerinin sıvı mikrodilüsuyon MİK değerleri ile yüksek oranda
uyum göstermesi beklenmektedir. Disk elüsyon yöntemiyle güvenilir MİK değerlere
ulaşılabileceğinin belirlenmesi halinde, diğer yöntemlere göre daha kolay ve az
masraflı olan bu yöntemin, rutin laboratuvarlarda kullanılabileceği gösterilmiş
olacaktır. Böylece kan dolaşımı enfeksiyonlarından izole edilen çoğul dirençli
bakterilerle infekte hastaların tedavisine hızlı, güvenilir şekilde katkı
sağlayacak sonuçlar ve kombinasyon seçenekleri elde edilebileceği
düşünülmektedir.