32.Ulusal Biyofizik Kongresi, İstanbul, Türkiye, 17 - 19 Kasım 2021, ss.69
Amaç: Bu
çalışmada, Favipiravir ve Montelukast’ın diferansiyel taramalı kalorimetre
(DSC) ve Fourier dönüşümlü kızılötesi spektroskopisi (FTIR) ile
karakterizasyonu yapılarak, A549 (insan akciğer kanseri) hücrelerinde
canlılık değerlerinin incelenmesi hedeflenmiştir.
Gereç ve Yöntemler: İlaçlar
FTIR ölçümlerinde 3 mg, DSC ölçümlerinde 10 mg olarak kullanıldı. Numuneler
25-300 oC sıcaklık aralığında, azot ortamda 5 oC/dak.
ısıtmayla DSC ile analiz edilmiştir. A549 hücreleri, DMEM-F12 medyumu %1
penisilin streptomisin ve %10 Fetal sığır serumu (FBS) ile tamamlandıktan
sonra 37 oC ve %5 CO2 atmosfer altında inkübe edilmiştir.
96’lık plakalara 5000 hücre/kuyu olacak şekilde ekilmiştir. 24 saat süre
inkübe edilen plakalara, 30,
60, 90 ve 120 µM konsantrasyonlarda Montelukast ve 5, 10, 20 ve 40 µg/ml konsantrasyonlarda
Favipiravir uygulandıktan 72 saat sonra, hücreler MTT ile muamele
edilmiş ve absorbans değerleri 570 nm dalga boyunda plaka okuyucuda
saptanmıştır. Sonrasında IC50 değerleri belirlenmiştir.
Bulgular: FTIR çalışmaları ile, montelukast
sodyum için; C-Cl, C-S, C=N, C=C, C-H favipiravir için; N-H, C=O, C=N, C-N, C-F
bağlarını içeren verilere ulaşılmıştır. DSC analizleri ile montelukast-sodyum
ilacı için 163 ℃ ve 274 ℃’lerde olmak üzere iki karakteristik tepe noktası
ile gerçekleşen reaksiyonların ∆H değerleri sırasıyla, -221.92 J/g ve -278.71
J/g olarak saptanmıştır. Favipiravir için ise tepe değerleri yaklaşık olarak
137 ℃, 183 ℃ ve 200 ℃ olan üç karakteristik pik görülmüştür. İlgili tepe
değerleri için ise ∆H değerleri sırasıyla -50,14 J/g, -91,42 J/g ve -9,19 J/g
olarak hesaplanmıştır. 72 saat süre söz konusu olduğunda IC50 değeri Montelukast
için, yaklaşık 35 µM,
favipiravir için 41 µM olarak belirlenmiştir.
Sonuç: Favipiravir
ve Montelukastın IC50 değerleri 41 ve 35, 72 h IC50 değerleri µM olarak belirlenmiştir. Ayrıca
denatürasyon eğrileri ve FTIR izleri belirlenerek, karakteristik eğrileri
elde edilmiştir. |
|
Anahtar Sözcükler: |
Montelukast-sodyum, Favipiravir, DSC, FTIR, IC50 |
Aim: In this study, it was aimed to examine the viability values of
Favipiravir and Montelukast in A549 (human lung cancer) cells by
characterizing them with differential scanning calorimetry (DSC) and Fourier
transform infrared spectroscopy (FTIR).
Material and Method: Drugs were used as 3 mg in FTIR measurements and 10 mg in DSC
measurements. In DSC measurements, samples were analyzed between 25-300 ℃,
with 5 ℃/min. heating rate under nitrogen atmosphere. A549 cells were
incubated at 37 °C and 5% CO2 atmosphere after supplementation
with DMEM-F12 medium with 1% penicillin streptomycin and 10% Fetal bovine
serum (FBS). Cells were seeded as 5000 cell/well in 96 well-plate. After
incubation of 24 hours, the cell were subject to 30, 60, 90 and 120 µM Montelukast and 5, 10, 20 and 40 µg/ml
Favipiravir. After 72 hours, cells were treated with MTT and absorbance
values were determined in a plate reader at 570 nm wavelength. Finally, IC50
values were determined.
Results: FTIR studies revealed C-Cl, C-S, C=N, C=C, C-H for Montelukast-sodium
and N-H, C=O, C=N, C-N, C-F bonds for favipiravir. DSC analysis has shown
that ∆H values of the reactions occurring with two characteristic peaks at
163 ℃ and 274 ℃ for Montelukast-sodium drug were determined as -221.92 J/g
and -278.71 J/g, respectively. For Favipiravir, three characteristic peaks
with peak values of approximately 137°C, 183°C and 200°C were observed. For
the relevant peak values, ∆H values were calculated as -50.14 J/g, -91.42 J/g
and -9.19 J/g, respectively. For 72 hours, the IC50 value was determined as
approximately 35 µM for Montelukast and 41 µM for favipiravir. Conclusion: The IC50 values of favipiravir and Montelukast were determined as 41
and 35, 72 h IC50 values in µM. In addition, denaturation curves and FTIR
traces were determined and characteristic curves were obtained. |
|
Montelukast-sodium,
Favipiravir, DSC, FTIR, IC50 |
|