Comparison of Ovine Spermatozoal Morphological Features After Staining of Fixation and Assessment of Morphological Abnormalities in Dead/Live Spermatozoa


ÖZTÜRKLER Y., BARAN A. , EVECEN M. , AK K. , İERİ İ. K.

TURKISH JOURNAL OF VETERINARY & ANIMAL SCIENCES, cilt.25, ss.675-680, 2001 (SCI Expanded İndekslerine Giren Dergi)

  • Cilt numarası: 25 Konu: 5
  • Basım Tarihi: 2001
  • Dergi Adı: TURKISH JOURNAL OF VETERINARY & ANIMAL SCIENCES
  • Sayfa Sayıları: ss.675-680

Özet

Bu aşamada (i) koç spermatozoitlerinin morfolojik ?özellikleri ?üzerine iki ayrı boyama yönteminin ve bir fiksatif solusyonun etkisinin karşılaştırılması ve (ii) Eosin-Nigrosin boyama yöntemi kullanılarak ?ölü/canlı spermatozoada morfolojik ?özelliklerin araştırılması amaçlanmıştır. Taze spermatozoitlerin morfolojik ?özellikleri Eosin-Nigrosin, sadece Nigrosin ile boyandıktan veya Hancock’un tamponlu formol-tuz solusyonu ile fikse edildikten sonra Phase Contrast mikroskobu kullanılarak incelendi. 6 adet Kıvırcık koç’un, 42 adet taze, pooling yapılmış sperma ?örnekleri kullanıldı. Hancock’un solusyonu ile fiksasyondan sonra akrozomal ve toplam morfolojik anormaliteler sırasıyla ortalama %3,97 ve %14,78 iken, aynı değerler Eosin-Nigrosin boyama yönteminde %10,07 ve %18,54 ve Nigrosin boyama yönteminde ise %7,97 ve %18,45 olarak saptandı (P<0.05). Eosin-Nigrosin ile boyamadan sonra ?ölü? spermatozoitlerde aynı morfolojik anormaliteler sırasıyla %15,38 ve %24,42 olarak bulunurken, canlı spermatozoitlerde ise sırasıyla %4,21 ve %10,80 olarak kaydedildi (P<0.05). Sonuç olarak, koç spermatozoitlerinin boyama işlemlerinin akrozomal ve toplam morfolojik ?özellikler ?üzerine zararlı etkisi olduğu, dolayısıyla ?ölü? spermatozoitlerde aynı morfolojik ?özelliklere ait anormalitelerin arttığı kanısına varılmıştır. Anahtar Sözcükler: Koç, spermatozoa, fiksasyon, boyama

The objectives of this study were to (i) compare the effects of two staining techniques and one fixative solution on the morphological features of ram spermatozoa and (ii) evaluate the morphological features of dead/live spermatozoa by using Eosin-Nigrosin staining. The morphological features of raw spermatozoa were evaluated (by Phase Contrast microscopy) after staining with Eosin-Nigrosin mixture or Nigrosin (alone), or after fixation with HancockÕs buffered formol saline solution. 42 raw pooled semen samples from 6 Kıvırcık rams were used. The percentages of spermatozoa with abnormal acrosomes and total morphological abnormalities averaged 3.97% and 14.78% in HancockÕs solution, compared with averages of 10.07% and 18.54%; 7.97% and 18.45% for smears stained with Eosin-Nigrosin or Nigrosin (alone), respectively (P<0.05). The percentages of the same features for dead spermatozoa averaged 15.38% and 24.42%, compared with averages of 4.21% and 10.80% for live spermatozoa,respectively (P<0.05). These results suggest that staining procedures were detrimental to the acrosomes and total morphological features, thus increasing the total morphological and acrosomal abnormalities in dead ram spermatozoa. Key Words: Ram, spermatozoa, fixation, staining