Prostat kanseri hücrelerinden mikroRNA salınımının in vitro karakterizasyonu
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: İstanbul Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Onkoloji Enstitüsü Bölümü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2015
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ZEYNEP DUYGU TİRYAKİOĞLU
Danışman: Uğur Gezer
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Gelişimi ve ilerleyebilmesi için androjenlere bağımlı bir malignite olan prostat kanserinde (PKa), hastaların tanı ve takibinde kullanılan belirteçlerin sınırlı özgüllük ve duyarlılığa sahip olması yeni biyobelirteçlerin gereksinimini doğurmuştur. Özgüllükleri ve kandaki kararlılıkları nedeniyle biyobelirteç adayı olarak öne çıkan mikroRNA'lardan (miRNA'lar) miR-141 ve miR-375'in artmış plazma düzeylerinin ileri evre/metastatik PKa ile ilişkisi olabileceği güncel çalışmalarda bildirilmektedir. Bu noktadan hareketle tez çalışmasında, miR-141 ve miR-375 ifadelerinin düzenlenmesinde ve hücre dışına salınımlarında androjenin etkisi incelenmiştir. Bu iki moleküle ilaveten, androjenler tarafından düzenlendiği bilinen moleküller olan "prostat spesifik antijen" (PSA) mRNA ve "prostat kanseri antijen 3" (PCA3) karşılaştırma molekülleri olarak incelendi. Bu amaçla, metastatik PKa soyu olan LNCaP hücreleri, androjenlerden arındırılmış besiyerinde çoğaltılmalarını takiben 24 saat süresince 0, 1, 10, 100 nM 5α-dihidrotestosteron (DHT) ile muamele edildiler. Hücrelerden ve kültür besiyerinden tüm RNA izole edilip cDNA'ya çevrilerek gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonunda, miR-141 ve miR-375 moleküllerinin miktar tayini yapıldı. Tez bulguları, DHT etkisinin moleküller arasında farklılık gösterdiğini ortaya koymaktadır. LNCaP hücrelerinin androjenle muamelesi, miR-141 ve miR-375 ifadesini kontrol hücrelerine göre ortalama 1,5 kat (p=0,07) arttırırken, PSA ve PCA3 üzerindeki etki çok daha belirgindi. Doza bağlı olarak PSA mRNA düzeylerinde 14-30 kat, PCA3 düzeylerinde ise 200 kata kadar artış saptandı (p<0,001). Moleküllerin hücre dışına salınımları, PCA3 dışında, hücresel androjen uyarımlarına benzer bulundu. DHT muamelesi, hücrelerden besiyerine yüksek düzeyde (9-12 kat) PSA mRNA salınımını sağlarken, miR-141 salınımı 1,7 ve miR-375 salınımı 1,4 kat artmıştır. Besiyerinde PCA3 ölçülebilir düzeyde saptanamamıştır. Çalışmanın deneysel sonuçları, miR-141 ve miR-375'in androjen tarafından düzenlenmesinin, PSA ve PCA3'e göre farklılık gösterebileceğini ortaya koymaktadır.